生物技术制药实验指南

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普通高等教育“十三五”规划教材

本教材是在参考了大量国内外经典著作与文献的基础上，结合编者多年的生物技术研究经验以及对本门学科的理解，精心挑选出了与生物技术制药理论课程中基因工程、细胞工程、抗体工程和发酵工程相关性最强，在实际应用中最广的实验作为实践内容，剔除了一些实践操作性不强，实际应用不多的实验，并且实验内容与专业具有很强的相关性，具有基础性强、适用范围广和应用性突出的特点，可以重点增强学生生物技术制药基础实践能力的培养，与同类教材相比更具有针对性和实用性。本教材不仅可作为高等学校生物制药、生物技术等专业的实验课程教材，也可供从事生物技术制药、生物技术应用相关的技术人员实验参考用书。

内容简介

本书包含五章内容，前四章分别以基因工程、细胞工程、抗体工程和发酵工程为主线，对其涉及的基因工程上下游技术、细胞培养技术、单克隆和多克隆抗体制备技术以及微生物培养技术的基础实验做了重点介绍；第五章为综合设计实验，内容包括系统运用大肠杆菌和毕赤酵母分别进行蛋白类药物制备，以及人血红蛋白单克隆抗体的制备和工业微生物的筛选与鉴定。

目录

第一章 基因工程与制药技术
实验一 质粒DNA提取
实验二 琼脂糖凝胶电泳检测DNA
实验三 PCR法扩增DNA及鉴定
实验四 DNA的重组拼接技术
实验五 化学转化法大肠杆菌感受态细胞的制备
实验六 电转化法大肠杆菌感受态细胞的制备
实验七 重组质粒的诱导表达
实验八 重组蛋白的纯化
实验九 蛋白质的定量分析
实验十 SDS-PAGE 电泳实验
实验十一 Western blotting实验
实验十二 酶联免疫吸附实验

第二章 细胞工程与制药技术
实验一 植物细胞培养基的制备
实验二 植物愈伤组织的培养
实验三 植物原生质体的制备
实验四 植物原生质体的分离与融合
实验五 动物细胞原代培养
实验六 动物细胞的传代培养
实验七 动物细胞的冻存与复苏

第三章 抗体工程与制药技术
实验一 小鼠脾细胞的制备
实验二 细胞融合与培养
实验三 杂交瘤细胞筛选
实验四 单克隆抗体的纯化
实验五 多克隆抗体的制备与纯化

第四章 发酵工程与生物技术制药
实验一 微生物基础培养基的配制
实验二 无菌操作及微生物接种技术
实验三 微生物数量的测定
实验四 比浊法测定微生物的生长曲线
实验五 曲霉固体发酵生产纤维素酶及酶解底物反应

第五章 综合设计实验
实验一 人血清白蛋白在大肠杆菌中的重组表达及制备
实验二 白细胞介素II在毕赤酵母中的重组表达及制备
实验三 人血红蛋白单克隆抗体的制备
实验四 高产聚苹果酸菌株筛选分离