基因工程实验指导

推荐语

普通高等教育“十三五”规划教材

本书是基因工程实验指导的教学用书，可供相关院校师生参考使用。

内容简介

该教材内容分三个层次：基础篇——综合篇——提高篇。

基础篇主要介绍基因工程实验中几大关键性技术，注重培养学生基本的实验技能。以介绍实验原理和操作步骤为主，同时增加实验讨论部分，重点强调学生实际操作过程中的注意事项；综合篇主要是五项科研成果转化为实验教学内容，项目的设计模拟科研内容进行设计，编写主要围绕着实验设计思路、实验步骤、实验结果及注意事项及时间安排几方面来进行。内容既包括应用于植物抗病毒领域中基因的克隆，同时也包括常用于分子生物学领域中的标记蛋白（绿色荧光蛋白）的表达；提高篇中内容的设计主要是针对学有余力的同学，体现因材施教的教学理念，学生利用课余时间通过实验室开放进行，主要是对综合篇中部分实验内容的进一步深化，是对以往所学知识的总结和提高。培养学生基本的科研素质和能力，为今后的科学研究和毕业实习奠定基础。

目录

前言

第一节 基因工程实验课的重要性

一、DNA的半保留复制实验证据

二、DNA是遗传物质的两个关键性实验证据

第二节 基因工程实验的诞生与发展

一、基因工程的准备阶段

二、基因工程问世

三、基因工程的迅速发展阶段

第三节 基因工程实验室的要求

一、实验室规则

二、注意事项

第四节 如何成为实验高手

一、做实验的有心人，遵循实验流程

二、做好实验课前的预习

三、认真写好实验报告

第二章 背景资料

第一节 基因工程概述

一、基因工程的特征

二、基因工程的主要内容

三、基因工程的操作流程

第二节 基因工程的工具之一——载体

一、载体的定义

二、载体的基本要求和特点

三、载体的分类及种类

四、质粒

第三章 学生实验

实验一 质粒DNA的提取与分析技术

实验二 琼脂糖凝胶电泳技术

实验三 PCR扩增技术

实验四 DNA酶切与检测技术

实验五 DNA酶切产物的纯化技术

实验六 DNA重组及重组体鉴定技术

实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备技术及DNA重组体的转化技术

实验八 马铃薯Y病毒部分衣壳蛋白基因（PVYCP450）的克隆

实验九 增强型绿色荧光蛋白基因的克隆与表达

实验十 PCR体外扩增绿色荧光蛋白基因及其克隆与表达

实验十一 谷胱甘肽转硫酶-绿色荧光蛋白融合蛋白的基因克隆及其表达

实验十二 中国鲎鲎素-抗菌肽串联基因杆状病毒表达载体构建

实验十三 香港牡蛎Foxl2蛋白的原核表达及其鉴定

实验十四 利用SDS-PAGE电泳和蛋白质转移电泳(WesternBlotting)鉴定重组蛋白

实验十五 绿色荧光蛋白的分离、纯化及其鉴定155附录：基因工程综合与提高

实验问题汇编